Expressão de uma esfingomielinase de Trichoderma harzianum com potencial para controle de bacterioses em plantas

Abstract

A agricultura é uma importante atividade para a economia do Brasil, que é um dos maiores produtores mundial de alimentos. Os principais fatores que ocasionam perdas aos sistemas agrícolas em todo o mundo são as doenças de plantas. Em geral as plantas são dotadas de mecanismos naturais de defesa para se protegerem contra patógenos Contudo, as plantas por si só não podem resistir ao ataque, e por isso, várias estratégias para controle de doenças têm sido utilizadas. O controle biológico de pragas, por exemplo, é uma abordagem baseada no uso de organismos específicos para o controle de patógenos. Neste contexto, nos últimos anos técnicas de genômica e transcriptômica estão sendo utilizadas para analisar os mecanismos moleculares envolvidos no controle biológico. Em Vieira et al. (2013) foram identificados genes diferencialmente expressos por Trichoderma harzianum durante contato com Fusarium solani. Dentre os genes com potencial uso biotecnológico que tiveram a expressão aumentada, o gene da esfingomielinase ácida (Thasm) destacou-se no primeiro contato entre os fungos. Devido à atividade da enzima o gene da esfingomielinase foi selecionado como gene candidato para transformação de plantas. O objetivo desse trabalho, portanto, foi de analisar a atividade da esfingomielinase de Trichoderma sp. em linhagens de tabaco geneticamente modificadas (Nicotiana tabacum) e transformar geneticamente laranjeira (Citrus sinensis L. Osbeck) para induzir resistência à bactérias fitopatogênicas. Os resultados apresentados nesse trabalho demonstraram que plantas transgênicas de tabaco expressando o gene da esfingomielinase obtiveram resistência às bactérias Pseudomonas syringae e Xilela fastidiosa. Este estudo serviu como uma validação para confirmação do potencial de ação da esfingomielinase contra patógenos. Com os resultados de resistência obtidos surge uma nova perspectiva para o desenvolvimento de estratégias para a expressão desta molécula em culturas de interesse econômico, afetadas por doenças causadas por infecções bacterianas. Depois de construir e introduzir o vetor de expressão em Agrobacterium tumefaciens, as plantas de laranja foram geneticamente transformadas. As brotações regeneradas confirmadas positivas por PCR foram microenxertadas e estão sendo aclimatadas em casa de vegetação. Uma vez estabelecidas, as plantas serão desafiadas em bioensaios com fungos patogênicos e bactérias para verificar o nível de resistência.