Análise do efeito do tratamento fotodinâmico mediada por nanoemulsão contendo cloreto de alumínio-ftalocianina sobre a produção de hidrolases de Humicola grisea var. thermoidea e Penicillium echinulatum

Abstract

O tratamento fotodinâmica (TFD) consiste na foto-oxidação de um composto biológico mediada por um fotossensibilizante que será exposto a luz de comprimento de onda adequado, resultando na produção de Espécies Reativas de Oxigênio (EROs) e radicais livres, gerando estresse oxidativo intracelular, o que pode causar danos e alterar a homeostase. Em fungos filamentosos, a administração do TFD resultou em inibição do crescimento de forma dose-dependente, aumento na sensibilização do fungo para tratamento concomitante com outras drogas, com pouco sucesso na completa inativação dos mesmos. Tendo isso em vista, a combinação de fungos com fotossensibilizantes apresenta potencial para ser usado como um sistema fotocatalítico em diversas áreas, buscando entender a citotoxicidade por vias oxidativas e possíveis efeitos além da inativação. Assim sendo, esse trabalho visou a investigar o potencial efeito do TFD mediado por cloreto de alumínio-ftalocianina em nanoemulsão (AlPc-NE) em dois fungos filamentosos produtores de hidrolases, Humicola grisea e Penicillium echinulatum, principalmente no tocante à produção de enzimas hidrolíticas. Os fungos, em seu estado vegetativo, foram expostos à diferentes concentrações de AlPc-NE para avaliação da capacidade de internalização do fotossensibilizante, via espectrofotômetro e microscopia de fluorescência. Uma vez estabelecido padrões de retenção do fotossensibilizante prosseguiu-se com o TFD mediada por 300 e 600 nM de AlPc-NE e análise de viabilidade. Após TFD, H. grisea foi crescido em Bagaço de Cana-de-açúcar (BCA), Farelo de Trigo (FT) e Glicose e análises realizadas após 12 e 96 h. Para P. echinulatum utilizou-se os mesmos substratos com adição de Celufloc© e análises foram realizadas após 96 e 120 h. Foram avaliadas a quantidade de proteínas solúveis secretadas, atividade antioxidante total no sobrenadante, e atividade das enzimas CMCase, xilanase e FPase. Após irradiação não houve alteração no crescimento e viabilidade dos fungos. Alterações na quantidade total de proteína secretada, atividade antioxidante total, atividade de CMCase e de xilanase, foram observadas após TFD, e tais alterações variam de acordo com a concentração de fotossensibilizante utilizado, substrato avaliado e espécie de fungo. Entre as atividades enzimáticas avaliadas, a de xilanase foi a mais expressiva e a de FPase foi a menos expressiva para ambos os fungos estudados. Dessa forma, foi observado impacto na produção de hidrolases causado pela administração do TFD.