Extratos do fruto de Guazuma ulmifolia (mutamba) : perfil fitoquímico, avaliação do potencial anti-inflamatório e nano-encapsulação com poli (ácido lácticoco-ácido glicólico)

Abstract

Dentre os frutos do Cerrado brasileiro, a Guazuma ulmifolia Lam., ou mutamba, se destaca devido à presença de compostos bioativos de interesse para pesquisas. O objetivo desta pesquisa é estudar o perfil fitoquímico em extratos de média polaridade e identificar compostos fenólicos em extratos dos frutos de G. ulmifolia, bem como a avaliar o potencial antioxidante e anti-inflamatório, relacionados ao teor de compostos fenólicos nestes frutos. Nos extratos dos frutos, foram avaliados os teores de compostos fenólicos totais, flavonóides totais, taninos condensados, o potencial antioxidante, Também, foram avaliadas a viabilidade celular (método de 3(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio brometo - MTT) e a produção de Espécies Reativas de Oxigênio (EROs) e Óxido Nítrico (NO) em células de macrófagos de murino (RAW 264.7), fibroblastos de camundongo (NIH-3T3) e endotelial de aorta humana (EAHy 926), bem como a atividade anti-inflamatória através da produção de Fator de Necrose Tumoral - alfa (TNF-α) e Interleucina 10 (IL-10) em macrófagos de murino e a toxicidade para Artemia salina. Os compostos fenólicos identificados por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplada a Espectrometria de Massas de Alta Resolução (CLAE-EMAR) foram: ácido protocatequínico, ácido gentísico, ácido cafeico, ácido p-cumárico, ácido vanílico, ácido gálico, catequina, epcatequina, quercetina-3-O-β-glucosídeo, rutina, quercetina, naringenina, luteolina e kaempferol. Os extratos do fruto de G. ulmifolia apresentaram alto teor de compostos fenólicos e alto potencial antioxidante. Nos extratos metanólico (ExMet) e de acetato de etila (ExAc), os teores de compostos fenólicos, flavonóides, taninos condensados e o potencial antioxidante foram, respectivamente: 2145,0 e 5292,6 mg de AGE/100g; 264,87 e 546,02 mg de flavonóides/100 g; 729,05 e 557,67 mg de CE/100 g; EC50 = 147,6 e 67,63 μg.mL-1 .Os extratos ExMet e ExAc apresentaram-se pouco tóxicos para Artemia salina, sendo esta toxicidade maior para os extratos metanólicos da casca (DL50 = 60 μg.mL-1 ) e da polpa (DL50 = 42 μg.mL-1 ). O extrato metanólico da semente não foi tóxico em nenhuma das concentrações testadas. O teste de viabilidade celular mostrou que o ExMet não exerceu efeito citotóxico sobre nenhuma das células testadas, enquanto o ExAc apresentou baixa citotoxicidade, com 48,37% (macrófagos) e 51,71% (fibroblastos) de células viáveis para a maior concentração empregada (500 μg.mL-1 ). Nenhum dos extratos alterou a produção de EROs nos ensaios realizados com as células RAW 264.7 e NIH-3T3, mas, ambos reduziram a produção de EROs para as células EAHy 926. A presença dos extratos nas três células não reduziu a produção de NO nas condições analisadas (sem estímulo de LPS). As análises de produção de TNF -α e IL-10, após adição dos extratos (0,25 mg.mL-1 ) em macrófagos, apontaram que o ExMet possui significativa resposta à inflamação, reduzindo TNF-α, sem alterar a produção de IL-10. A nanoencapsulação do ExAc em PLGA, pelo método de emulsão-evaporação, também foi investigada, obtendo-se nanopartículas poliméricas com formatos esféricos, diâmetro médio de 192 nm e índice de polidispersão de 0,59, conforme análise por MET. Os valores de DhM e o PdI das nanopartículas suspensas em água, determinados por DLS, foram de 237 nm e 0,108, e não houve variação significativa durante 30 dias de avaliação. A média da eficiência de encapsulação foi de 12,7%, valor considerável do ponto de vista da encapsulação de um extrato vegetal.