Avaliação do efeito da piplartina e cinamidas em cultivos de Leishmania amazonensis, Plasmodium falciparum e de células peritoneais de camundongos swiss

Abstract

As leishmanioses e a malária são consideradas um problema de saúde pública no mundo. A piplartina é uma amida obtida da espécie Piper tuberculatum (Piperaceae) que tem se mostrado promissora em testes antiparasitários, por isso, vem sendo utilizada como base para síntese de novas moléculas. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da piplartina (1) e cinamidas (2, 3, 4 e 5), in vitro, em Leishmania amazonensis e Plasmodium falciparum, bem como sobre as funções das células/macrófagos peritoneais de camundongos swiss. Assim, cultivos de L. amazonensis, eritrócitos humanos com P. falciparum e células peritoneais de camundongos foram incubados com diferentes concentrações de 1, 2, 3, 4 e 5 e avaliados pelos métodos MTT,coloração com nigrosina e/ou coloração com giemsa. As funções celulares como 1) aderência e capacidade microbicida, 2) produção de peróxido de hidrogênio, 3) produção de óxido nítrico, 4) formação de corpúsculos lipídicos e 5) indução de morte celular, foram avaliadas por coloração com giemsa e com contagem das células em microscopia óptica; marcação com tetramethylbenzidine e peroxidase tipo II; reagente de Greiss; oil red; e pela marcação com anexina e iodeto de propídio, respectivamente, tratadas com 1 e 5. Os resultados da redução do MTT (L. amazonensis ou células peritoneais) e da parasitemia por microscopia (P. falciparum) mostraram que a piplartina (1) e as cinamidas (2, 3, 4 e 5) inibiram o crescimento dos protozoários, sendo a 5 mais ativa contra Leishmania sp. e a 1 contra Plasmodium sp. e nos cultivos de células peritoneais a média ± DP para o CC50 foi de 294,4 ± 85,7. Além dos resultados de redução do MTT, houve uma diminuição da viabilidade para os cultivos de L. amazonensis e para as células peritoneais pela coloração com nigrosina. A piplartina (1) e a cinamida 5 reduziram a média ± DP do percentual de células peritoneais aderidas sobre as lamínulas em relação ao controle não tratado. Para as demais funções celulares foi observada uma diminuição do índice de infecção dos macrófagos infectados e uma modulação do sistem imune, pela diminuição da adesão dos macrófagos peritoneais infectados, pela influência na produção de peróxido de hidrogênio, óxido nítrico, corpúsculos lipídicos em macrófagos infectados e, especificamente, a cinamida 5, pela diminuição do percentual de células viáveis que estavam aderidas sobre a placa, e pela tendência a causar um aumento do percentual de células em apoptose inicial, e aumento no percentual de células em apoptose tardia/necrose. Nossos resultados mostraram a potencialidade das amidas 1 e 5 no tratamento da malária e da leishmaniose e sugerem a continuidade dos estudos pré-clínicos para avaliar seus efeitos in vivo.