Estudo dos fatores clínicos e imunológicos associados à disseminação de Leishmania sp para a mucosa nasal e avaliação da segurança de antígeno de montenegro em camundongos

Abstract

Introdução: Uma parte dos pacientes com Leishmaniose tegumentar americana desenvolvem lesões mucosas com consequentes deformidades. A compreensão da fisiopatogênese da forma mucosa é limitada pelo escasso conhecimento dos fatores associados à disseminação do parasito e pelo grande intervalo de tempo que pode existir entre o desenvolvimento das lesões cutânea e mucosa da doença. Objetivo: Avaliar fatores clínicos e imunológicos fatores associados à disseminação de Leishmania spp para a mucosa nasal através de avaliação clínica e laboratorial sistematizada. Além disso procuramos validar novo antígeno de leishmania produzido na UnB. Métodos: Foi realizado estudo transversal onde foram incluídos consecutivamente pacientes atendidos no ambulatório de Leishmaniose do Hospital Universitário de Brasília. Os pacientes foram submetidos a fotografias sistematizadas das lesões e os exames dermatológico/otorrinolaringológico foram registrados em fichas específicas. Citocinas inflamatórias foram medidas no soro. O desfecho principal foi a presença de DNA de leishmania em swab nasal realizada por PCR. Também foi testado antígeno derivado da cepa MHOM/BR/PH8 o qual foi inoculado em camundongos B57BL/6 com avaliação de segurança por parâmetros clínicos, laboratoriais e histopatológicos. Resultados: Para avaliar a associação entre os níveis de citocinas IL-12, IL-6, TNFα, IL-10, IL-1β e IL-8 e a presença de leishmania em mucosa nasal foi construído um modelo de regressão de Poisson considerando interações multivariadas de características clínicas e laboratoriais. Dos 79 pacientes com Leishmaniose cutânea, 24 (30%) apresentavam DNA de L. (V.) braziliensis na mucosa nasal. No modelo multivariado, a presença de DNA do parasito na mucosa foi associada à redução dos níveis de IL-12 (RP = 0,440; p = 0,034), aumento dos níveis de IL-6 (RP = 1,001; p = 0,002) e maior número de afetados segmentos corporais (RP = 1,65; p <0,001). Em um segundo modelo as áreas de infiltração, mácula e eritema foram maiores em pacientes com a disseminação de leishmania para a mucosa nasal, mas a associação não foi significativa. Após a aplicação do antígeno derivado da cepa MHOM/BR/PH8 foi verificada infecção por leishmania em um dos camundongos. Não foram verificados outros sinais clínicos, laboratoriais e histopatológicos de toxicidade em nenhum dos outros camundongos. Conclusões: O modelo multivariado sugeriu que a indução de um perfil Th1 com a produção de IL-12 é importante para prevenir a disseminação de L. (V.) braziliensis para a mucosa. Observamos uma taxa de disseminação precoce de Leishmania spp para a mucosa nasal maior do que a descrita anteriormente. O antígeno testado no estudo produziu possível infecção em um dos camundongos, não sendo seguro para testes em humanos.