Análise das alterações moleculares em testículos submetidos à fotohipertermia mediada por nanopartículas como método de indução de infertilidade

Abstract

O objetivo do presente trabalho foi investigar alterações moleculares causadas pelo procedimento de fotohipertermia mediada por nanopartículas (FHT) aplicada a testículos de ratos Wistar. Os animais foram tratados e divididos de acordo com o momento da eutanásia: 24 horas, 72 horas e 7 dias após o procedimento. Os testículos foram medidos, pesados e segmentados, uma parte destinada para avaliação de marcadores moleculares e uma parte para avaliação histopatológica. Para a análise de marcadores moleculares foi realizada a extração do RNA total das amostras e analisada a expressão dos genes Mtrf1, Trf2, CLDN11 e StAR, normalizados pelos genes GAPDH e B-actin. Os genes Mtrf1 e Trf2 apresentaram uma redução significativa na expressão após o tratamento, principalmente nos grupos de 24h e 72h, mantendo-se baixos no grupo de 7 dias. O gene CLDN11 não apresentou diferença estatística, porém é possível observar uma tendencia de aumento, mais evidente nos animais analisados 7 dias após a FHT. O gene StAR teve maior expressão nos testículos dos animais tratados 24h após o tratamento, mesmo com variação entre os animais, e reduziu após 72h e 7 dias. As análises histopatológicas mostraram alterações sutis nos grupos 24h e 72h, porém sendo visível o início de vacuolização e células exfoliadas no lúmen de alguns túbulos. Nas amostras de 7 dias as alterações foram mais pronunciadas, com maior vacuolização, redução do tamanho dos túbulos e necrose coagulativa extensa. O trabalho mostrou que o tratamento de FHT testicular afeta a expressão de genes que podem estar envolvidos em vias de produção de ROS ou proteção antioxidante, e as análises histopatológicas mostram os danos causados pelo tratamento, corroborando que o procedimento causa danos irreversíveis à função testicular precocemente. Ainda é necessário analisar a expressão de outros genes para identificar melhor a via de regulação.