Diversidade molecular e funcional de proteínas da saliva de Triatoma infestans, um vetor da doença de Chagas

Abstract

O Triatoma infestans, um dos vetores mais importantes da Doença de Chagas na América Latina, alimenta-se do sangue de vertebrados em todos os seus estágios – ninfas e adultos. As glândulas salivares de insetos hematófagos produzem compostos farmacologicamente potentes que impedem a hemostasia do hospedeiro, incluindo moléculas anticoagulantes, antiplaquetárias e vasodilatadoras. A saliva de T. infestans medeia a hidrólise de NDBC6HPC, um substrato para PAF-AH (platelet-activating factor-acetilhidrolase), em pH neutro. A purificação dessa atividade foi obtida por cromatografia em FLPC utilizando colunas de troca catiônica e interação hidrofóbica. A atividade enzimática ótima foi descrita como independente de Ca+2 e associada a uma proteína de 17 kDa (PAF-AH de T. infestans; PATi) em SDS-PAGE sob condições redutoras. Experimentos de espectrometria de massa sugerem que PATi é membro da família de fosfolipases A2. Anticorpos específicos localizaram a enzima nas glândulas salivares D2. Esses dados sugerem que a hidrólise de PAF pelo inseto possa interferir nas respostas anti-hemostática e/ou nociceptiva do hospedeiro. Com o objetivo de compreender melhor a complexidade bioquímica e farmacológica deste inseto, uma biblioteca de cDNA de suas glândulas salivares foi seqüenciada. Proteínas salivares também foram submetidas à eletroforese bidimensional seguida de análise por espectrometria de massa. Neste trabalho, nós apresentamos a análise de um grupo de 1534 seqüências de cDNA das glândulas salivares, das quais 645 codificam para proteínas putativamente secretadas. A maioria das proteínas salivares descritas como lipocalinas – 55% da biblioteca de cDNA – coincidiram com seqüências peptídicas dos resultados proteômicos. Esperamos que a obtenção desses novos transcritos salivares possa auxiliar no esclarecimento da função de moléculas salivares nas interações entre o vetor e o hospedeiro e na descoberta de novos agentes farmacológicos.