Investigação do efeito da administração de eritropoietina no auto-transplante heterotópico de tecido ovariano criopreservado de gatas domésticas

Abstract

A criopreservação e transplante de tecido ovariano são métodos que permitem a conservação de gametas femininos. No entanto, no processo de transplante há um período inicial de isquemia que afeta a sobrevivência e o desenvolvimento dos folículos, o que é especialmente prejudicial para os tecidos criopreservados. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da eritropoietina (EPO) em tecido ovariano de gata criopreservado e autotransplantado para um sítio periférico. Para isso, cinco gatas adultas (n=5) foram utilizadas. Quatro delas foram tratadas com EPO (500 UI/Kg/dia, sc) durante sete dias (três dias antes, no mesmo dia e três dias após a ovariohisterectomia) e uma delas não recebeu EPO (controle). Todas as gatas foram submetidas a ovariohisterectomia e pequenos fragmentos de tecido ovariano foram retirados e criopreservados (congelamento lento com 1,5M DMSO). Após 3 dias, os tecidos ovarianos foram descongelados e transplantados para o tecido subcutâneo da região dorsal do pescoço da mesma gata de origem (autotransplante heterotópico). Os enxertos foram retirados após 7, 14, 21, 28, 49 e 63 dias, processados para histologia e corados com hematoxilina-eosina e tricotômico de Gomori. O número de folículos morfologicamente normais após a criopreservação do tecido ovariano, tanto no animal controle quanto no grupo tratado com EPO, apresentou uma redução significativa. No dia 7 pós-transplante, as porcentagens de folículos primordiais morfologicamente normais foram de 45,1% (32/71) no animal controle e de 86% (54/63) no grupo tratado com EPO. Do dia 14 em diante, muito poucos folículos foram encontrados no tecido transplantado. Não obstante, nos dias 28, 49 e 63 pós-transplante ainda foram observados alguns folículos morfologicamente normais. O grupo tratado com EPO apresentou “follicle-like structures” em todos os dias pós-transplante avaliados, e em maior número em comparação com o animal controle, exceto no dia 28 pós-transplante. O processo inflamatório foi menor no grupo tratado com EPO nos dias 7 e 14 pós-transplante. Vasos sanguíneos foram observados em todos os dias após o transplante, mas nos dias 7, 14 e 63 pós-transplante o grupo tratado com EPO apresentou uma maior quantidade de vasos sanguíneos. O grupo tratado com EPO apresentou menor área de fibrose no córtex do tecido ovariano, nos dias 7, 49 e 63 pós-transplante. Em conclusão, a EPO permitiu obter uma melhor sobrevivência folicular, uma maior vascularização e menor área de fibrose no dia 7 pós-transplante, não obstante, a morte folicular massiva foi mantida nos outros dias de transplante do tecido criopreservado.