Avaliação do potencial antitumoral do inibidor de telomerase mst-312 em modelo in vitro de câncer de mama

Abstract

Para que uma célula cancerosa possa proliferar indefinidamente ela deve ser imortalizada, ou seja, desenvolver mecanismos de alongamento dos telômeros. A telomerase é uma enzima que restaura a integridade dos telômeros, e está presente em 85% dos tipos de câncer, o que a torna um potencial alvo terapêutico. Este estudo avaliou o potencial antitumoral do inibidor de telomerase MST 312 em modelo in vitro de câncer de mama da linhagem telomerase positiva MDA-MB-231. Foram determinados para a análise: Grupo P (sem tratamento), Grupo D (tratado com o veículo do inibidor) e Grupo M (tratado com o inibidor de telomerase MST-312). Para avaliar o impacto da heterogeneidade tumoral no efeito do MST-312, foi realizada seleção clonal e cultura monoclonal, demonstrando que o padrão proliferativo e a redução da resposta ao inibidor sofrem interferência da heterogeneidade tumoral. Para esclarecer o impacto da exposição ao MST-312 no ciclo celular foi realizado ensaio de avaliação do ciclo celular por citometria de fluxo onde não foi observado diferença estatística entre os grupos. Foi investigado os efeitos do uso combinado de MST-312 com quimioterápicos como docetaxel, irinotecan e doxorrubicina. Para investigar possíveis mudanças no perfil proliferativo foi realizado o ensaio de cultura celular 3D, onde foi avaliada a viabilidade e o volume dos esferoides. Não houve diferença entre os grupos, sugerindo que a exposição ao MST-312 não interferiu no padrão proliferativo nesse modelo. Com o objetivo de analisar a indução de resistência à múltiplas drogas (MDR) pelo MST 312, foram realizados ensaios de atividade e expressão de proteínas do fenótipo MDR e não foi observado atividade e expressão mensurável dessas proteínas. Os resultados demonstram que a exposição prolongada in vitro ao MST-312 não induziu a superexpressão de P-gp/MRP1 e atividade das bombas de efluxo P-gp, MRP1 e BCRP. Este estudo demonstrou que o inibidor de telomerase MST-312 tem potencial citotóxico a curto prazo e que a exposição prolongada sofre interferência da heterogeneidade tumoral, entretanto, o tratamento prévio com MST-312 não sensibilizou as células a ação dos quimioterápicos e não induziu variação significativa da atividade e expressão das bombas de efluxo do fenótipo de resistência à múltiplas drogas (P-gp/MRP1 e BCRP). Os resultados sugerem que o MST-312 pode ser um modelo para o estudo de potenciais drogas inibidoras da telomerase.