Estudo in vitro da função de CD90 em células-tronco tumorais de glioblastoma

Abstract

Gliomas são tumores que se originam das células da glia que incluem um grupo heterogêneo de tumores, sendo o glioblastoma multiforme (GBM) aquele de maior agressividade e pior prognóstico. O GBM grau IV caracteriza-se por ser policlonal e de grande heterogeneidade clínica e morfológica, tendo grande recorrência tumoral e resistência aos tratamentos. Ainda hoje, o entendimento da gênese dos tumores do Sistema Nervoso é um desafio que dificulta a obtenção de terapias mais seguras e tratamentos mais eficazes, dessa forma, inúmeras pesquisas dentro dessa temática buscam a caracterização da célula-tronco tumoral com o intuito de esclarecer questões sobre a biologia do tumor e o seu tratamento. A glicoproteína CD90 (Thy-1) é um marcador celular presente em células tronco de glioblastomas e também em outros tipos de câncer e células não-tumorigênicas. Sabe-se que esta molécula está envolvida com processos de adesão, proliferação e migração e está relacionada com a oncogênese de alguns tumores, sendo apontada como um promissor marcador além de ser marcador de células de câncer e não cancerígenas ser um marcador de células-tronco para estes tumores, contudo, pouco se sabe, sobre a relação entre CD90 e a morfologia e a função dentro da morfogênese de glioblastomas. Assim, esta pesquisa teve como objetivo estabelecer a relação entre o marcador CD90 com a morfologia e capacidade tumorigênica e de diferenciação in vitro. Assim, o objetivo deste trabalho foi de obter linhagens primárias de células de glioblastoma humano com expressão reduzida de CD90 para investigar a função de CD90 no potencial de diferenciação de células de glioblastoma. Metodologia: Foi avaliada a função de CD90 por meio da caracterização morfológica e de potenciais de diferenciação osteogênica, adipogênica e neuronal, utilizando meios indutores específicos, em células primárias de glioblastoma multiforme. Foi estabelecida uma população de células para estudo através da redução da expressão de CD90, usando vetores lentivirais que expressam shRNACD90, e outra subpopulação desta, pela separação de células com uma coluna magnética e anticorpos anti-CD90, além de grupos controles para cada análise. Resultados: Nosso trabalho mostrou que a progressiva redução da expressão de CD90 resultou em menor eficiência nas capacidades de formação de neurosfera e de diferenciação osteogênica e adipogênica destas células. Surpreendentemente, observamos que a ablação de CD90 parece favorecer um pouco a diferenciação neuronal das células de glioblastoma. Conclusão: Desta maneira, o estudo sugere que a CD90 afeta negativamente a capacidade das célula-tronco de glioblastoma de gerar tumor e também sua capacidade de diferenciação.