O efeito da β-ciclodextrina na expressão de metaloproteinases de matriz, colágeno e no sistema antioxidante de fibroblastos dérmicos humanos in vitro

Abstract

O envelhecimento da pele é determinado por fatores genéticos e ambientais, sendo estes últimos principalmente associados à alta exposição à luz UV e também a outros xenobióticos. No processo de envelhecimento da pele, encontramos elevada expressão de metaloproteinases de matriz (MMPs) associada à baixa produção biossintética de proteínas estruturais da pele, como o colágeno. As ciclodextrinas (CDs) são oligossacarídeos cíclicos, frequentemente usados como carreadores de fármacos e ativos cosméticos, e que são bem conhecidas como depletoras de colesterol da membrana plasmática das células. Estudos anteriores demonstraram a capacidade do colesterol em agir como segundo mensageiro intracelular, diminuindo a expressão de MMP. Neste contexto, os objetivos deste estudo foram avaliar o efeito da β-ciclodextrina (β-CD) e da 2-hidroxipropil-β-ciclodextrina (2-HP-β-CD) na expressão de genes relacionados ao processo de envelhecimento da pele e no estado redox de fibroblastos dérmicos humanos in vitro. As células (CCD1059Sk e HFF-1) foram cultivadas e tratadas com diferentes concentrações de β-CD ou 2-HP-β-CD e a expressão gênica foi avaliada por RT-qPCR. Os resultados demonstraram a capacidade da β-CD, de reduzir a expressão gênica de COL1A1 e TIMP-1. Uma expressão aumentada de MMP-14 pôde ser observada nas células tratadas com β-CD ou 2-HP-β-CD, sendo que a β-CD também provocou um aumento na expressão dos genes da MMP-2, MMP-3 e MMP-9. O ensaio de zimografia foi realizado para verificar o efeito das CDs na atividade de MMP-2, entretanto nenhum resultado significativo foi encontrado. Apesar das CDs não provocarem um aumento do estresse oxidativo intracelular, o tratamento das células com β-CD ou 2-HP-β-CD, em todas as concentrações testadas, causou uma redução da atividade da catalase, uma importante enzima antioxidante. Os resultados do ensaio para avaliar a liberação de lactato desidrogenase (LDH) para o meio extracelular mostraram uma perda significativa da integridade da membrana celular. Em conclusão, os resultados deste trabalho sugerem que as CDs não são adjuvantes farmacêuticos completamente inertes e que estas podem influenciar as bases moleculares do processo de envelhecimento da pele.